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產(chǎn)品分類 / PRODUCT
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產(chǎn)品名稱:TK10細(xì)胞
規(guī)格:25T
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況:
如果【TK10細(xì)胞】未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已長滿(達(dá)80-90%)。即可進(jìn)行傳代,具體步驟如下:
1棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。
2向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml*液,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,吸取*,加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞。
3加入等量的的培養(yǎng)液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)
4傳代比例:1:2-1:3
如生長緩慢:
1.培養(yǎng)基或血清改變 比較不同培養(yǎng)基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有無差異;通過生長實驗比較新老批次血清有無差異;增大細(xì)胞初始接種密度;使細(xì)胞逐步適應(yīng)新的培養(yǎng)基。
2.必需生長促進(jìn)成分(如L-*或生長因子)耗竭、缺乏或分解 去除原培養(yǎng)基,加入新鮮培養(yǎng)基;向培養(yǎng)基中添加生長促進(jìn)成分(如L-*)。
3.輕度細(xì)菌或真菌污染 在不添加抗生素的條件下進(jìn)行培養(yǎng),如細(xì)胞被污染,滅菌處理后丟棄。
4.時間存儲不當(dāng) 血清應(yīng)于-5℃至-20℃下儲存;培養(yǎng)基應(yīng)于2℃~8℃下避光儲存;盡量減少血清和培養(yǎng)基見光時間。
5.細(xì)胞初始接種密度低 增大活細(xì)胞接種密度。
6.細(xì)胞衰老、老化 將老化細(xì)胞丟棄,取用代數(shù)較少的細(xì)胞。
7.支原體污染 隔離細(xì)胞,檢測是否感染支原體;清洗通風(fēng)廚和培養(yǎng)箱,如細(xì)胞被污染,滅菌處理后丟棄。
其它細(xì)胞株列表:Lewis 肺癌細(xì)胞 品牌ATCC 規(guī)格25毫升/株. 貨期1-2周
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