大鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(rat eNOS）ELISA試劑盒檢測所需時(shí)間不到5小時(shí)，數(shù)據(jù)性價(jià)比高，大多都有現(xiàn)貨，種屬齊全，提供免費(fèi)代測、技術(shù)指導(dǎo)、*售后服務(wù)。

精密度：其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%  

產(chǎn)品別名：大鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(rat eNOS）ELISA試劑盒

英文縮寫：rat eNOELISA KIT

安全性：對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性  ，

特異性：含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng)  ，

簡便性：在定性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果判斷簡單明了，定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡單

大鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(rat eNOS）ELISA試劑盒問：用制備好的單克隆抗體做ELISA試驗(yàn)，用的是間接、雙抗體夾心、競爭法中的哪種方法啊？請各位老師指教。測的是抗原是不是？具體的操作應(yīng)該是什么

答：用的是間接ELISA。

測的不是抗原，是抗體，看看產(chǎn)生的抗體是否與你的目的蛋白反應(yīng)。

間接ELISA的操作很多書上都有的，看看這個(gè)吧：

間接ELISA的步驟

陽性克隆的篩選采用間接ELISA方法進(jìn)行平行篩選。

大鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(rat eNOS）ELISA試劑盒包被： 首先以方陣法測得純化重組蛋白的合適包被濃度，然后將蛋用pH9.6的碳酸鹽包被液稀釋至3ug/mL，每孔100uL包被ELISA板，4℃過夜。

洗滌： 將包被好的酶標(biāo)板微孔中的液體全部棄去，并用PBST溶液洗滌3次，方法是先將每個(gè)微孔中加入300uL PBST溶液，放置3min后，將微孔中的PBST溶液全部倒出，再重加入相同體積新的PBST溶液，重復(fù)上面的操作，共3次。

封閉：用封閉液（PBST+5%小牛血清）4℃封閉12h。PBST洗滌3次，每次5min。

加*抗體：加入雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)上清，100uL/孔，37℃作用2h，同時(shí)設(shè)立陽性、陰性及空白對照。

洗滌：棄去含*抗體的溶液，按照上述相同的方法用PBST溶液對酶標(biāo)板進(jìn)行洗滌。

大鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(rat eNOS）ELISA試劑盒加第二抗體：將酶標(biāo)抗體按照使用說明中*的稀釋倍數(shù)稀釋于封閉液中，混合均勻后，向每個(gè)微孔中加入100uL，37℃溫箱中溫育1h。

洗滌：棄去含有第二抗體的溶液，按照上述相同的方法用PBST溶液對酶標(biāo)板進(jìn)行洗滌。

顯色：加入新鮮配置的TMB顯色液顯色，37℃作用15min，之后用終止液終止反應(yīng)。

記錄：在酶標(biāo)儀上測定OD450值。

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