腎損傷標(biāo)志物NGAL的免疫學(xué)檢測(cè)

NGAL是中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白，并在人體組織細(xì)胞中廣泛分布，如支氣管、胃、小腸、胰腺、腎、前列腺、胸腺等。近年研究發(fā)現(xiàn)，NGAL與腎臟關(guān)系十分密切，目前有大量的實(shí)驗(yàn)和臨床研究表明，腎損傷后NGAL的表達(dá)量顯著增高并分泌到體液中，NGAL被認(rèn)為是新的早期腎損傷生化標(biāo)志物。那么，制備特異性NGAL抗體并建立相應(yīng)的NGAL免疫檢測(cè)方法非常重要。

原核表達(dá)了重組人NGAL蛋白作為抗體制備的免疫原，并制備出特異性NGAL單克隆和多克隆抗體，同時(shí)還有標(biāo)記抗體。對(duì)于這些抗體的特異性我們都有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行支撐，如下圖的WB和IHC即對(duì)抗體的檢測(cè)驗(yàn)證。

在獲得特異性抗體后就需要建立NGAL免疫學(xué)檢測(cè)方法，我司應(yīng)用棋盤(pán)滴定法確定ELISA體系z(mì)ui工作條件，研發(fā)出了NGAL定量檢測(cè)ELISA試劑盒以及CLIA試劑盒。試劑盒的線性檢測(cè)范圍0.156-10ng/mL，靈敏度達(dá)到0.069ng/ml，回收率為78%-102％，試劑盒的線性、穩(wěn)定性，批內(nèi)批間CV%都經(jīng)過(guò)反復(fù)的驗(yàn)證，產(chǎn)品可靠。